あたらしい眼科

《原著》あたらしい眼科30（7）：1029.1033，2013c新潟大学ロービジョン外来における緑内障患者の受診状況本間友里恵＊1張替涼子＊1石井雅子＊1,2阿部春樹＊2福地健郎＊1＊1新潟大学大学院医歯学総合研究科生体機能調節医学専攻感覚統合医学講座視覚病態学分野＊2新潟医療福祉大学GlaucomaPatientConsultationatNiigataUniversityLow-VisionClinicYurieHonma1）,RyokoHarigai1）,MasakoIshii1,2）,HarukiAbe2）andTakeoFukuchi1）1）DivisionofOphthalmologyandVisualScience,GraduatedSchoolofMedicalandDentalSciences,NiigataUniversity,2）NiigataUniversityofHealthandWelfare目的：ロービジョン外来を受診した緑内障患者の受診状況を検証し，緑内障患者にロービジョン外来受診を勧める時期や背景について検討した．対象および方法：対象は，2000年9月から2009年8月までの9年間にロービジョン外来を受診した緑内障患者121例，平均年齢61.5±17.2歳である．視覚障害による困難を聴取し，それに対応し必要なロービジョンケアを行った．良いほうの眼の視力を0.5以上の良好群と0.4以下の不良群の2群に，良いほうの眼のGoldmann視野病期を早期・中期群と晩期群の2群に，年齢を20.60歳の就労年齢群と61.88歳の高齢群の2群にそれぞれ分類し，改善したい困難（ニーズ）について視力，視野および年齢別に比較検討した．結果：視覚障害による困難は読書81.8％，羞明55.4％，歩行52.1％，書字33.9％，日常生活19.0％の順に多かった．羞明は視力良好群で80.5％および視野晩期群で73.1％，歩行は就労年齢群で64.2％，書字は視力不良群で41.3％および視野晩期群で44.8％，日常生活は視力良好群で36.6％，遠見は視力不良群で15.0％および視野晩期群で16.4％，就労は就労年齢群で17.0％とそれぞれ他群に比べ困難の訴えの割合が有意に多かった（p＜0.05，c2検定）．結論：視力および視野が良好であっても患者の生活・社会環境によってはさまざまな困難を自覚しており，障害が軽度であってもロービジョンケアを必要とする場合があることを理解する必要がある．Purpose：Toassessthetimingandbackgroundoflow-visionclinicvisitrecommendationbyexaminingtheconsultationsituationofglaucomapatientsconsultingourlow-visionclinic.SubjectsandMethods：Subjectscomprised121patients61.5±17.2yearsofagewhoconsultedourlow-visionclinicduringthe9yearsfromSeptember2000toAugust2009.Eachpatientconsultedwithusregardingdifficultiesarisingfromvisualimpairment；weprovidedthenecessarylow-visioncare.Weclassifiedthesubjectsintotwogroupsbasedonthevisualacuityofthebettereye：onegroupabove0.5,theotherbelow0.4.WealsoclassifiedthesubjectsintotwogroupsbasedontheimpairmentstageofthebettereyeintermsofGoldmannvisualfield：early,intermediateandlatestage.Thesubjectswerealsoclassifiedintotwoagegroups：theworkingagegroup（20-60yearsofage）andtheseniorgroup（61-88yearsofage）.Wethenexaminedandcomparedthegroupsbasedonvisualacuity,visualfieldandage,intermsoftheirneeds（visionproblemstheywishedtoimprove）.Results：Inorderofnumberofcases,manypatientssufferedfromvisualimpairmentthatcausedreadingdifficulties（81.8％）,photophobia（55.4％）,walkingdifficulties（52.1％）,writingdifficulties（33.9％）andotherdifficultiesindailylife（19.0％）.Ofthebettervisualacuityandseverevisualfieldimpairmentgroups,80.5％and73.1％,respectively,sufferedfromphotophobia；64.2％ofpatientsintheworkingagegroupexperiencedproblemswithwalking；41.3％oftheworsevisualacuitygroupand44.8％ofthelatevisualimpairmentstagegrouphadtroublereadingandwriting；36.6％ofthoseinthebettervisualacuitygrouphaddifficultiesindailylife；15.0％ofthoseintheworsevisualacuitygroupand16.4％intheseverevisualfieldimpairmentgroupsufferedfromfar-sightedness.Meanwhile,17.0％oftheworkingagegroupindicatedhavingdifficultyworking,showingasignificantlyhigherratioofdifficultiesthananyothergroup（p＜0.05,chi-squaretest）.Conclusions：Regardlessofgoodvisualacuityandvisualfield,patientsareawareofvariousdifficultiesrelatingtothesocialenvironmentandtheirdailylife.Thisstudyrevealedtheimportanceofunder〔別刷請求先〕本間友里恵：〒951-8510新潟市中央区旭町通1-757新潟大学大学院医歯学総合研究科生体機能調節医学専攻感覚統合医学講座視覚病態学分野Reprintrequests：YurieHonma,DivisionofOphthalmologyandVisualScience,GraduatedSchoolofMedicalandDentalSciences,NiigataUniversity,1-757Asahimachidori,Chuo-ku,Niigata-shi,Niigata951-8510,JAPAN0910-1810/13/\100/頁/JCOPY（147）1029standingtheneedtoprovidelow-visioncareevenforindividualswithmildvisualimpairment.〔AtarashiiGanka（JournaloftheEye）30（7）：1029.1033,2013〕Keywords：緑内障，ロービジョンケア，ニーズ．glaucoma,lowvisioncare,needs.はじめに近年，社会の老齢化に伴い治療できない視覚障害のために視機能が低下したままの状態，すなわちロービジョンで生活せざるをえない人口は増加している．日本眼科医会の報告では，わが国における視覚障害者は164万人ともいわれ，緑内障は視覚障害の原因の首位疾患である1）．また，大規模な緑内障の疫学調査である多治見スタディでは，40歳以上の日本人の緑内障有病率は5.0％であることが報告されている2）．緑内障では無症状のままゆっくりと緩慢に視機能が障害されるため，自覚症状が現れたときにはかなり病状が進行し患者のqualityoflife（QOL）が極端に損なわれていることもしばしばみられる．それゆえ治療・視機能の管理と並行してロービジョンケアを行う必要性について認識されつつあるが，ケア導入のタイミングはむずかしい3）．今回，筆者らは緑内障により視機能に低下をきたし新潟大学眼科ロービジョン外来を受診した患者の視機能の状態と，視機能障害による困難およびロービジョンケアの内容について調査し検討したので報告する．I対象および方法2000年9月から2009年8月までの9年間にロービジョン外来を受診した340人のうち，緑内障と診断された121例（男性70例，女性51例）を対象とした．ロービジョンケアの開始年齢は5.88歳，平均61.5±17.2歳である．緑内障の病型は原発開放隅角緑内障（primaryopenangleglaucoma：POAG）が52例，続発緑内障（secondaryglaucoma：SG）が31例，正常眼圧緑内障（normaltensionglaucoma：NTG）が24例，原発閉塞隅角緑内障（primaryangleclosureglaucoma：PACG）および発達緑内障（developmentalglaucoma：DG）が各7例である．見えにくいことによる，どのような困難を改善したいのか（ニーズ）を聴取し，それに対応した必要なロービジョンケアを行った．ロービジョンケアの内容は遮光眼鏡，近用拡大鏡および単眼鏡などの処方，タイポスコープ，拡大読書器などの指導，福祉制度，便利グッズおよび障害年金などの情報提供である．良いほうの眼の視力を0.5以上の良好群と0.4以下の不良群2群に，良いほうの眼のGoldmann視野病期を湖崎分類4）に従って早期・中期群と晩期群の2群に，年齢を20.60歳の就労年齢群と61.88歳の高齢群の2群にそれぞれ分類し，ニーズについて視力，視野および年齢別に比較検討した．1030あたらしい眼科Vol.30，No.7，2013データの解析にはc2検定を用い，危険率5％以下を有意差ありとした．II結果1.受診患者の視力および視野良いほうの視力は0.01未満が4例（3.3％），0.01.0.05が18例（14.9％），0.06.0.09が15例（12.4％），0.1.0.4が43例（35.5％），0.5.0.9が22例（18.2％），1.0以上が19例（15.7％）であった（図1）．良いほうのGoldmann視野は湖崎分類のIIa期およびIIb期が各1例（0.8％），IIIa期が34例（28.1％），IIIb期が14例（11.6％），IV期が38例（31.4％），Va期が7例（5.8％），0.01未満1.0以上419（3.3％）0.01～0.0518（14.9％）0.1～0.443（35.5％）0.5～0.922（18.2％）（15.7％）0.06～0.0915（12.4％）図1良いほうの視力（n＝121）0.4以下：80例，0.5以上：41例．n（）：症例数（％）．不測IIa期41IIb期（3.3％）（0.8％）1Va期7（5.8％）IIIb期14Vb期22（18.2％）IIIa期（0.8％）34（28.1％）（11.6％）IV期38（31.4％）図2良いほうの視野（n＝121）早期・中期：50例，晩期：67例，測定不能：4例．n（）：症例数（％）．（148）Vb期が22例（18.2％）であった．3例は幼少のため，1例は明（55.4％），歩行（52.1％），書字（33.9％），日常生活（19.0知的な障害のため測定不能であった（図2）．％），遠見（10.7％）と続く（図3）．2.ニーズとロービジョンケアの内容ロービジョンケアの内容は，処方では多い順に，遠用遮光ニーズには複数の回答があった．読書の困難を改善したい眼鏡（34.7％），近用拡大鏡（30.6％），白杖（28.9％），近用という訴えが最も多く全体の81.8％にみられた．つぎに羞眼鏡（17.4％），拡大読書器（14.1％）であった．指導および情報提供では補装具および日常生活用具の身体障害者手帳（視覚）のサービス，税金の減免，NKK受信料の割引などの読書福祉制度についての情報提供が76.9％と最も多かった．つ羞明ぎに近用拡大鏡（57.9％），見えにくいことによる日常生活歩行書字の不自由さを助ける便利グッズ（52.9％），タイポスコープ・日常生活筆記用具（46.8％），拡大読書器（44.6％）と続く（図4）．遠見ニーズに対応したケアでは，読書および書字の困難には近福祉情報心理的不安用拡大鏡，近用眼鏡，拡大読書器，近用遮光眼鏡，書見台の就労処方を行った．処方にあたっては十分な試用のうえ，可能でパソコンあれば1週間程度の貸し出しの後に処方した．再来時に使用就学その他状況を確認し，処方された補助具やタイポスコープを用いて01099（81.8）67（55.4）63（52.1）41（33.9）23（19.0）13（10.7）11（9.1）10（8.3）9（7.4）3（2.5）3（2.5）6（5.0）2030405060708090100（％）の読み書きの指導を行った．視機能を用いることが困難な場図3ニーズの割合（n＝121：複数回答あり）合は音声パソコン教室および録音図書の情報提供を行った．その他：車の運転，携帯電話の使い方，時計が見えない，視力就労の困難には事務作業の効率を上げるための音声パソコン回復，内科の処方薬と眼との関係，暗順応障害が各1例．教室の情報提供，パソコン画面のハイコントラスト設定の指a．処方遠用遮光眼鏡42（34.7）近用拡大鏡37（30.6）白杖35（28.9）近用眼鏡21（17.4）拡大読書器17（14.1）遠用眼鏡14（11.6）近用遮光眼鏡12（9.9）音声時計11（9.1）書見台10（8.3）単眼鏡4（3.3）その他15（12.4）0510152025303540（％）b．指導・情報提供福祉制度93（76.9）近用拡大鏡70（57.9）便利グッズ64（52.9）タイポスコープ・筆記用具59（48.8）拡大読書器54（44.6）障害年金38（31.4）照明37（30.6）点字・録音図書35（28.9）音声パソコン教室34（28.1）パソコンの画面設定21（17.4）眼球運動・偏心視訓練17（14.1）日常生活14（11.6）単眼鏡12（9.9）就労9（7.4）就学3（2.5）その他17（14.1）0102030405060708090（％）図4ロービジョンケアの内容（149）あたらしい眼科Vol.30，No.7，20131031表1ニーズの比較視力視野※1年齢※2良好群0.5以上n＝41不良群0.4以下n＝80p値早期・中期群IIa,IIb,IIIa,IIIbn＝50晩期群IV,Va,Vbn＝67p値就労年齢群20.60歳n＝53高齢群61.88歳n＝65p値n（％）n（％）n（％）n（％）n（％）n（％）読書34（82.9）65（81.3）0.8239（78.0）56（83.6）0.4541（77.4）55（84.6）0.31羞明33（80.5）34（42.5）＜0.01＊18（36.0）49（73.1）＜0.01＊35（66.0）32（49.2）0.07歩行19（46.3）44（55.0）0.3728（56.0）35（52.2）0.6934（64.2）29（44.6）0.03＊書字8（19.5）33（41.3）0.02＊11（22.0）30（44.8）0.01＊20（37.7）21（32.3）0.54日常生活15（36.6）8（10.0）＜0.01＊7（14.0）16（23.9）0.1812（22.6）11（16.9）0.44遠見1（2.4）12（15.0）0.03＊2（4.0）11（16.4）0.03＊6（11.3）7（10.8）0.92福祉情報4（9.8）7（8.8）0.863（6.0）8（11.9）0.498（15.1）3（4.6）0.05心理的不安3（7.3）7（8.8）0.794（8.0）6（9.0）0.855（9.4）5（7.7）0.74就労1（2.4）8（10.0）0.131（2.0）8（11.9）0.059（17.0）0（0.0）＜0.01＊パソコン2（4.9）1（1.3）0.22※32（4.0）1（1.5）0.40※33（5.7）0（0.0）0.05※3※1測定不能であった4例を除く．※2未成年の3例を除く．※3イエーツ（Yates）の補正済み．＊p＜0.05で有意差あり（c2検定）．導を行った．3.ニーズと視力，視野および年齢おもなニーズを視力，視野および年齢をそれぞれ2群して比較した（表1）．羞明は視力良好群で80.5％および視野晩期群で73.1％とそれぞれ視力不良群42.5％および視野早期・中期群36.0％に比べ困難を改善したいと訴える割合が有意に多かった．歩行は就労年齢群で64.2％と高齢群44.6％に比べ困難を改善したいと訴える割合が有意に多かった．書字は視力不良群で41.3％および視野晩期群で44.8％とそれぞれ視力良好群19.5％および視野早期・中期群22.0％に比べ困難を改善したいと訴える割合が有意に多かった．日常生活は視力良好群で36.6％と視力不良群10.0％に比べ困難を改善したいと訴える割合が有意に多かった．遠見は視力不良群で15.0％および視野晩期群で16.4％とそれぞれ視力良好群2.4％および視野早期・中期群4.0％に比べ困難を改善したいと訴える割合が有意に多かった．就労は就労年齢群で17.0％と高齢群0.0％に比べ困難を改善したいと訴える割合が有意に多かった．読書，福祉情報および心理的不安に関しては，2群間に差がみられなかった．III考按本研究は緑内障患者のロービジョンケアを導入した時期の状況を診療録から後ろ向きに調査したものである．緑内障のロービジョンケアについてはこれまでに多くの報告がある5.8）．また，緑内障患者のQOL評価についてはThe25itemNationalEyeInstituteVisualFunctionQueationnaire（VFQ-25）を用いての生活機能評価から，視機能の障害程度とQOLは相関することが報告されている8,9）．筆者らは，質問紙を用いず視機能の低下によってもたらされた困難のなかで改善を希望することを十分な時間をかけて面談により聴取し，そのニーズに対応したロービジョンケアを行った．今回の対象のロービジョン外来を受診した緑内障患者の病型は原発開放隅角緑内障が最も多く，つぎに続発緑内障，正常眼圧緑内障の順であった．わが国の緑内障の疫学調査である多治見スタディでは，緑内障の頻度は正常眼圧緑内障が最も多く，原発開放隅角緑内障は少ない．しかし，原発開放隅角緑内障や続発緑内障のような高眼圧の緑内障では視機能障害が重症化しやすく正常眼圧緑内障は重症化しにくいといわれている2）．ロービジョンケアを導入した緑内障患者は高眼圧で重症化しやすいタイプの緑内障が多かった．川瀬の報告8）ではケアを開始した時点の良いほうの眼の視力は0.7以上が89％，視野はHumphrey視野におけるAnderson分類10）にて重度が48％と最も多く，中心視力が良好なうちにケアが開始されていた．筆者らの調査では，ロービジョンケアを開始した時点の良いほうの眼の視力は0.1.0.4の35.5％が最も多く，視力0.7以上は20％に満たなかった．視野はGoldmann視野における湖崎分類4）でIV期の31.4％が最も多かった．ケア開始時の視力値に大きな違いがみられた．ロービジョンケア導入を勧めるタイミングが異なることがその原因であると考えられる．読書の困難をニーズとしてあげる者が全体の81.8％と最も多かった．視力，視野が良好であっても若年層においては読書の困難を自覚しやすいことがわかった．読書の困難に対応して近用拡大鏡の処方および指導，タイポスコープ・筆記用具の指導がロービジョンケアの内容として多かった．しか1032あたらしい眼科Vol.30，No.7，2013（150）し，川瀬8）のVFQ-25の下位尺度の平均点数では運転，心の健康や一般的健康の項目の点数が低く，近見の項目は低値を示していない．聞き取り方法の違いかもしれない．面談によるニーズの聴取では，患者は眼科医療機関で対応してもらえそうな困難を優先する．その結果，筆者らのクリニックでは補助具で解決できそうな読書や羞明のニーズが多く，心の不安を訴える患者は少なかったのではないかと推測される．ロービジョンケアの内容では，高橋ら7）は心のケアが最も多く，つぎに眼球運動訓練であると報告している．ロービジョンケアの内容は患者のニーズや導入時の緑内障の病期により異なる．視力良好群が不良群よりも，羞明および日常生活の困難の改善を訴えることは，興味深い結果であった．読書および歩行についてもわずかではあるが，視機能の良い群が悪い群より，困難の自覚の割合が多かった．その理由として，視機能障害の軽い群ではそれまでは自立して日常生活を送ってきたが不自由を感じ始めたという段階の患者が多いこと，また外出の機会が多いためではないかと推測できる．一方，視機能障害が進行している群ほど不自由になってからの期間が長く，保有視野での生活に適応している，家族の介助に頼ることに慣れてしまった，外出の機会が少なくなる，などの生活環境の変化により，困難を自覚しにくくなっている可能性がある．QOLの向上を目指すロービジョンケアは眼科医療において重要である11,12）．しかし，ロービジョンケアの導入のタイミングには視機能からの明確な基準はない．緑内障は視機能障害の進行が遅く自覚症状に乏しいという特徴があり，患者自身が視機能障害による生活の不自由さに慣れてしまっていることがロービションケアの導入をむずかしくしているのかもしれない．新潟大学眼科では，緑内障外来主治医が患者からの視機能障害による困難の訴えがあった場合に，ロービジョン外来の受診を勧めている．そのため緑内障の罹患期間が長く中心視野が消失した状態ではじめてロービジョンケアを受けるという患者もいる．その場合，患者自身のロービジョンケアに対する意識が乏しく，視力を回復させたいという思いから補助具を用いることに抵抗がありロービジョンケアの受け入れがうまくいかないこともある．視機能障害が軽度なほど補助具での見え方の満足度が高い．また，治療への期待が強い患者では障害への受容が遅れがちである．通常の診療では患者は積極的に見えにくいことによる不自由さを訴えることは少ない．定期の視野検査の後に，生活に支障がないか尋ねることや有効視野の位置を患者とともに確認するなどの医療側からのアプローチが，早期のロービジョンケア導入を可能にすると考える．本論文は第22回日本緑内障学会（2011年）にて発表した．利益相反：利益相反公表基準に該当なし文献1）日本眼科医会研究班報告2006.2008：日本における視覚障害の社会的コスト．日本の眼科80（6）：付録9-11,20092）IwaseA,SuzukiY,AraieMetal：fortheTajimiStudyGroupandJapanGlaucomaSociety：Theprevalenceofprimaryopen-angleglaucomainJapanese：theTajimiStudy.Ophthalmology111：1641-1678,20043）張替涼子：4）緑内障IV．年齢と疾患によるケアの特徴/3.疾患別特徴．眼科プラクティス14巻，ロービジョンケアガイド（樋田哲夫編），文光堂，20074）湖崎弘，井上康子：視野による慢性緑内障の病期分類．日眼会誌76：1258-1267,19725）浅野紀美江，川瀬和秀，山田敬子ほか：緑内障におけるロービジョンケア─視野による評価─．あたらしい眼科19：771-774,20026）西田朋美，三輪まり枝，山田明子ほか：医療連携でロービジョンケアを進めることができた緑内障の2例．あたらしい眼科27：155-158,20107）高橋広，花井良江，土井涼子ほか：柳川リハビリテーション病院におけるロービジョンケア─第8報：緑内障患者に対するロービジョンケア─．あたらしい眼科19：673-678,20108）川瀬和秀：疾患別ロービジョンケア“緑内障”．眼紀57：261-266,20069）山岸和矢，吉川啓司，木村泰朗ほか：日本語版VFQ-25による高齢者正常眼圧緑内障患者のqualityoflife評価．日眼会誌113：964-971,200910）AndersonDR,PatellaVM：AutomatedStaticPerimeter.2nded,p121-190,Mosby,StLouis,199911）簗島謙次：視覚障害のリハビリテーション.ロービジョン・クリニック．あたらしい眼科9：1273-1279,199212）田淵昭雄，河原正明，廣田佳子ほか：眼科リハビリテーション・クリニックの重要性と課題．眼紀49：695-700,1998＊＊＊（151）あたらしい眼科Vol.30，No.7，20131033

《原著》あたらしい眼科30（7）：1023.1028，2013c各種保存剤を用いた市販緑内障治療（配合）点眼液における角膜傷害性のキネティクス解析長井紀章＊1大江恭平＊1森愛里＊1伊藤吉將＊1,2岡本紀夫＊3下村嘉一＊3＊1近畿大学薬学部製剤学研究室＊2同薬学総合研究所＊3近畿大学医学部眼科学教室KineticAnalysisofCornealEpithelialCellDamagebyCommerciallyAvailableAnti-Glaucoma（Combination）Eyedrops,UsingFirst-OrderRateEquationNoriakiNagai1）,KyouheiOe1）,AiriMori1）,YoshimasaIto1,2）,NorioOkamoto3）andYoshikazuShimomura3）1）SchoolofPharmacy,2）PharmaceutialResearchandTechnologyInstitute,KinkiUniversity,3）DepartmentofOphthalmology,KinkiUniversitySchoolofMedicine本研究では，ヒト角膜上皮細胞（HCE-T）および一次速度式を用いて緑内障治療薬の急性および慢性毒性を算出し，invitro角膜上皮細胞傷害性評価を行った．緑内障治療薬は市販製剤であるアイファガンR，キサラタンR，チモプトールR，トラバタンズR，トルソプトR，ミケランR，ミロルR，ラタノプロスト「TS」（LPテイカ），イソプロピルウノプロストン「TS」（IUテイカ）および配合点眼薬であるザラカムR，デュオトラバR，コソプトRの12剤を用いた．本研究の結果，急性毒性はザラカムR＞キサラタンR＞IUテイカ＞ミケランR＞コソプトR≒LPテイカ≒ミロルR≒チモプトールR＞デュオトラバR≒トルソプトR＞トラバタンズR＞アイファガンRであり，慢性毒性はキサラタンR≒ザラカムR≒アイファガンR＞IUテイカ＞ミケランR≒ミロルR≒LPテイカ＞チモプトールR＞コソプトR＞デュオトラバR≒トルソプトR＞トラバタンズRの順であった．以上，一次速度式にて解析することで，点眼薬の角膜上皮細胞傷害性を評価できることを明らかとした．Inthisstudy,weinvestigatedcornealepithelialcelldamagecausedbycommerciallyavailableanti-glaucomaeyedrops.Wealsoperformedkineticanalysisofcornealepithelialcelldamage,usingthefirst-orderrateequation,andcalculatedeyedropacuteandchronictoxicity.Usedinthisstudywere12eyedroppreparations：AiphaganR,XalatanR,TimoptolR,TravatanzR,TrusoptR,MikelanR,MirolR,latanoprostgenericproducts（LPTeika）,isopropylunoprostonegenericproducts（IUTeika）andanti-glaucomacombinationeyedrops（XalacomR,DuotravR,CosoptR）.Eyedropacuteandchronictoxicitydecreasedinthefollowingorder：acutetoxicit：XalacomR＞XalatanR＞IUTeika＞MikelanR＞CosoptR≒LPTeika≒MirolR≒TimoptolR＞DuotravR≒TrusoptR＞TravatanzR＞AiphaganR；chronictoxicity：XalatanR≒XalacomR≒AiphaganR＞IUTeika＞MikelanR≒MirolR≒LPTeika＞TimoptolR＞CosoptR＞DuotravR≒TrusoptR＞TravatanzR.Theseresultsshowthatkineticanalysisofcornealepithelialcelldamagecausedbyeyedrops,usingHCE-Tandfirst-orderrateformula,issuitableforresearchingcornealdamagecausedbyanti-glaucomaeyedrops.〔AtarashiiGanka（JournaloftheEye）30（7）：1023.1028,2013〕Keywords：緑内障治療薬，速度論解析，ヒト角膜上皮細胞，急性毒性，慢性毒性．anti-glaucomaeyedrops,kineticanalysis,humancorneaepithelialcell,acutetoxicity,chronictoxicity.はじめに治療薬には多くの種類があるが，最も作用が強いという理由失明を伴う眼疾患である緑内障の要因には，眼圧とそれ以から，臨床ではおもにプロスタグランジン（PG）点眼薬が第外の因子（循環障害など）が考えられており，臨床では，緑一選択として用いられ，眼圧コントロールが困難な患者に対内障治療薬による薬物治療が第一選択となる．これら緑内障して作用機序の異なる複数の緑内障治療薬が適宜追加され〔別刷請求先〕伊藤吉將：〒577-8502東大阪市小若江3-4-1近畿大学薬学部製剤学研究室Reprintrequests：YoshimasaIto,Ph.D.,SchoolofPharmacy,KinkiUniversity,3-4-1Kowakae,Higashi-Osaka,Osaka577-8502,JAPAN0910-1810/13/\100/頁/JCOPY（141）1023る．しかし，緑内障治療薬の多剤併用や長期連続投与は点眼表層角膜症や眼瞼炎といった眼局所の副作用や，患者からのしみる，かすむ，眼が充血するといった訴えを増加させるとともに，患者のアドヒアランス低下に繋がる．これらの問題を改善すべく，近年ではsofZiaTM（塩化亜鉛，ホウ酸を含むソルビトール緩衝剤保存システム）を保存剤とするトラバタンズRや亜塩素酸ナトリウムを用いたアイファガンRのようなベンザルコニウム塩化物（BAC）非含有製剤が開発されている．また，ラタノプロスト・チモロールマレイン酸塩配合点眼薬であるザラカムRなどの配合点眼薬も市販され，これらBAC非含有製剤および配合点眼薬はqualityoflife（QOL）の高い治療法へ繋がるものとして注目されている．緑内障治療薬の角膜障害は，点眼薬中に含まれる主薬，添加剤，保存剤だけでなく，角膜知覚，涙液動態および結膜といったオキュラーサーフェス（眼表面）の状態が関与することが明らかとされ，臨床（invivo）および基礎（invitro）両面からの観察が重要であることが報告されている1）．筆者らはこれまで，緑内障治療薬による不死化ヒト角膜上皮細胞（HCE-T）傷害作用が，正常ヒト角膜上皮培養細胞への傷害作用に非常に類似し，さらに細胞増殖性，感受性にばらつきが少ないため，HCE-Tが正常ヒト角膜上皮細胞の代わりにinvitro角膜傷害性評価に使用できることを報告してきた2）．また，点眼薬処理時の角膜上皮細胞の生存率から細胞死亡率を測定し，一次速度式を用いた細胞傷害性解析にて，急性および慢性毒性を算出する方法（invitro角膜上皮細胞傷害性評価）が緑内障治療薬の角膜傷害性を明らかとするうえで有用であることを報告してきた3）．今回，HCE-Tを用い，緑内障治療薬処理時の細胞死亡率を測定し，一次速度式を用いた細胞傷害性解析を行うことで，現在臨床現場で多用されているBAC非含有点眼液および緑内障治療配合点眼液のinvitro角膜上皮細胞傷害性評価を行った．I対象および方法1.使用細胞培養細胞は理化学研究所より供与された不死化ヒト角膜上皮細胞（HCE-T，RCBNo.1384）を用い，100IU/mlペニシリン（GIBCO社製），100μg/mlストレプトマイシン（GIBCO社製）および5.0％ウシ胎児血清（FBS，GIBCO社製）を含むDMEM/F12培地（GIBCO社製）にて培養した．2.使用薬物緑内障治療薬は市販製剤である0.1％アイファガンR（主薬ブリモニジン酒石酸塩），0.005％キサラタンR（主薬ラタノプロスト），0.5％チモプトールR（主薬チモロールマレイン酸塩），0.004％トラバタンズR（主薬トラボプロスト），1％トルソプトR（主薬ドルゾラミド塩酸塩），2％ミケランR（カルテオロール塩酸塩），0.5％ミロルR（レボブノロール塩酸塩），キサラタンRの後発品である05％ラタノプロスト「TS」（LPテイカ），レスキュラRの後発品である0.12％イソプロピルウノプロストン「TS」（IUテイカ）の9剤および配合点眼薬であるザラカムR（主薬ラタノプロストおよびチモロールマレイン酸塩），デュオトラバR（主薬トラボプロストおよび表1各種緑内障治療薬に含まれる添加物緑内障治療薬添加物キサラタンRベンザルコニウム塩化物（0.02％），等張化剤，無水リン酸一水素Na，リン酸二水素Na一水和物アイファガンR亜塩素酸Na（濃度非公開），塩化Mg，ホウ酸，ホウ砂，カルメロースNa，塩化Na，塩化K，塩化Ca水和物，塩酸，水酸化NaミロルRベンザルコニウム塩化物（0.002％），リン酸二水素K，リン酸水素Na水和物，ピロ亜硫酸Na，等張化剤，pH調整剤，エデト酸Na水和物，ポリビニルアルコール（部分けん化物）ミケランRベンザルコニウム塩化物液（0.005％），塩化Na，リン酸二水素Na，無水リン酸一水素Na，精製水トラバタンズRホウ酸，塩化亜鉛，d-ソルビトール（sofZiaTM），プロピレングリコール，ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油40，pH調節剤2成分チモプトールRベンザルコニウム塩化物液（0.005％），水酸化Na，リン酸二水素Na，リン酸水素Na水和物トルソプトRベンザルコニウム塩化物液（0.005％），ヒドロキシエチルセルロース，d-マンニトール，クエン酸Na水和物，塩酸LPテイカベンザルコニウム塩化物（濃度非公開），グリセリン，トロメタモール，ヒプロメロース，等張化剤，ポリソルベート80，pH調節剤IUテイカクロルヘキシジングルコン酸塩（濃度非公開），ホウ酸，グリセリン，ステアリン酸ポリエチレングリコール，塩酸，トロメタモールザラカムRベンザルコニウム塩化物（0.02％），無水リン酸一水素Na，リン酸二水素Na一水和物，等張化剤デュオトラバR塩化ポリドロニウム（濃度非公開），ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油40，プロピレングリコール，ホウ酸，塩化Na，d-マンニトール，pH調節剤2成分コソプトRベンザルコニウム塩化物液（0.005％），ヒドロキシエチルセルロース，d-マンニトール，クエン酸Na水和物，水酸化Na下線は保存剤を，括弧はその濃度または名称を示す．1024あたらしい眼科Vol.30，No.7，2013（142）チモロールマレイン酸塩），コソプトR（主薬ドルゾラミド塩酸塩およびチモロールマレイン酸塩）の3剤の計12剤を用いた．表1には本研究で用いた各種緑内障治療薬中の添加物を示した．これら点眼薬は製薬会社からの提供ではなく，市販のものを購入しており利益相反はない．3.緑内障治療薬による細胞処理法HCE-T（50×104個）をフラスコ（75cm2）内に播種し，80％に達するまで培養した4,5）．この細胞を，0.05％トリプシンにて.離し，細胞数を計測後，96穴プレートに100μl（1×104個）ずつ播種し，37℃，5％CO2インキュベーター内で24時間培養したものを実験に用いた．実際の操作法として，HCE-T細胞を0，10，20，30，60または120秒間薬剤にて処理後，リン酸緩衝液（PBS）にて2回洗浄し，各wellに100μlの培地およびTetraColorONE（生化学社製）20μlを加え，37℃，5％CO2インキュベーター内で1時間処理後，マイクロプレートリーダー（BIO-RAD社製）にて490nmの吸光度（Abs）を測定した．本実験における細胞傷害評価にはTetraColorONEを用い，テトラゾリウム塩が生細胞内ミトコンドリアのデヒドロゲナーゼにより生産されたホルマザンを測定することで表した．本研究では，薬剤処理後の細胞死亡率（％）を次式（1）により算出した．細胞死亡率（％）＝（Abs未処理.Abs薬剤処理）/Abs未処理×100（1）また，薬剤処理が細胞傷害へ与える影響をより詳細に検討すべく，次式（2）を用いて解析を行った．Dt＝D∞･･t）（2）（1.e.kDkDは細胞傷害速度定数（min.1），tは点眼薬処理後の時間（0.2分），D∞およびDtは薬剤処理∞およびt分後の細胞死亡率を示す．本研究ではkD，D∞をそれぞれ急性毒性および慢性毒性として表した．4.統計学的処理実験結果は平均値±標準誤差（SE）で表した．有意差検定はJAMVer.5.1（日本SAS協会）コンピュータプログラムを用いて行った．各々の実験値はDunnettの多群間比較により解析した．また，本研究ではp値が0.05以下を有意差ありとした．II結果1.緑内障治療薬における角膜上皮細胞傷害性の比較表2にはアイファガンR，ミケランR，ミロルR，LPテイカおよびIUテイカにおける急性毒性（kD）と慢性毒性（D∞）を示す．いずれの処理群においても処理時間の増加とともに細胞死亡率の増加が認められ，傷害性に差がみられた．その急性毒性はIUテイカ＞ミケランR＞LPテイカ≒ミロルR≫アイファガンRの順であった．また，慢性毒性はアイファガンR＞IUテイカ＞ミケランR≒ミロルR≒LPテイカの順で低値を示した．なかでもアイファガンRの急性毒性は0.09±0.02min.1（平均値±標準誤差，n＝7）とこれまで測定した緑内障治療薬のなかで最も低値であった．2.緑内障治療剤・配合点眼液ザラカムR，デュオトラバRおよびコソプトRによる角膜上皮細胞傷害性表3は緑内障治療剤・配合点眼液ザラカムR処理における点眼薬の細胞傷害性を示す．キサラタンRおよびチモプトールRの主薬を有する配合点眼薬であるザラカムRの急性および慢性毒性はそれぞれ7.91±1.58min.1，100.9±3.5％（平均値±標準誤差，n＝5）であり，キサラタンRおよびチモプトールRの急性毒性と比較し，有意に高値であった（慢性毒性；ザラカムR≒キサラタンR＞チモプトールR，急性毒性；ザラカムR≫キサラタンR＞チモプトールR）．表4はトラバタンズRおよびチモプトールRの主薬を有する配合点眼薬であるデュオトラバR処理における点眼薬の細胞傷害性を示す．急性および慢性毒性ともに，デュオトラバRの毒性はトラバタンズRより高かったが，チモプトールRの毒性と比較し低値であった（急性および慢性毒性；チモプトールR＞表2各種緑内障治療薬処理における角膜傷害性の比較アイファガンRミロルRミケランRLPテイカIUテイカkD（min.1）0.09±0.021.81±0.122.45±0.191.79±0.132.63±0.17D∞（％）100.8±14.168.7±3.871.0±2.968.1±2.178.6±3.2平均値±標準誤差，n＝5.8．表3緑内障治療剤・配合点眼液ザラカムR処理における角膜傷害性ザラカムRキサラタンRチモプトールRkD（min.1）7.91±1.582.80±0.25＊1.78±0.06＊D∞（％）100.9±3.5101.5±6.646.6±1.3＊平均値±標準誤差，n＝5．＊p＜0.05vs.ザラカムR（Dunnettの多群間比較）．表4緑内障治療剤・配合点眼液デュオトラバR処理における角膜傷害性デュオトラバRトラバタンズRチモプトールRkD（min.1）1.20±0.030.27±0.07＊1.78±0.06＊D∞（％）12.2±0.93.9±0.3＊46.6±1.3＊平均値±標準誤差，n＝5．＊p＜0.05vs.デュオトラバR（Dunnettの多群間比較）．（143）あたらしい眼科Vol.30，No.7，20131025表5緑内障治療剤・配合点眼液コソプトR処理における角膜傷害性コソプトRトルソプトRチモプトールRkD（min.1）1.79±0.061.27±0.03＊1.78±0.06D∞（％）30.0±1.115.1±0.1＊46.6±1.3＊平均値±標準誤差，n＝5．＊p＜0.05vs.コソプトR（Dunnettの多群間比較）．デュオトラバR＞トラバタンズR）．表5はトルソプトRおよびチモプトールRの主薬を有する配合点眼薬コソプトR処理における点眼薬の細胞傷害性を示す．コソプトRの急性毒性はコソプトR≒チモプトールR＞トルソプトRの順であり，慢性毒性はチモプトールR＞コソプトR＞トルソプトRと，コソプトRの慢性毒性はチモプトールRと比較し有意に低値であった．III考按筆者らはこれまで，一次速度式を用いた細胞死亡率解析により点眼薬点眼時の角膜に対する急性および慢性毒性の算出法を確立した3）．また，現在臨床現場で多用されている緑内障治療薬PG点眼薬先発品（キサラタンR，レスキュラR，トラバタンズRおよびタプロスR）や代表的なラタノプロスト後発品（LPケミファ，LPセンジュ，LPわかもとおよびLPサワイ），チモプトールR，トルソプトR，デタントールR，ハイパジールRおよびサンピロRなどの急性および慢性毒性を算出し，その毒性の強度について報告してきた3）．本研究ではこれら一次速度式を用いたinvitro角膜上皮細胞傷害性評価法により，新たにアイファガンR，ミケランR，ミロルR，LPテイカおよびIUテイカといった，臨床で多用されるBAC非含有点眼液および緑内障治療配合点眼液について評価を行った．さらに，近年注目されている緑内障治療剤・配合点眼液3種（ザラカムR，デュオトラバRおよびコソプトR）についての検討も行った．まず，配合点眼液を除くアイファガンR，ミケランR，ミロルR，LPテイカおよびIUテイカについて評価を行った．いずれの処理群においても処理時間の増加とともに細胞死亡率の増加が認められ，その急性毒性はIUテイカ＞ミケランR＞LPテイカ≒ミロルR≫アイファガンRの順であった．慢性毒性はアイファガンR＞IUテイカ＞ミケランR≒ミロルR≒LPテイカの順で低値を示した（表2）．筆者らはこれまで，pHは4.4.7.5内では，本実験系の細胞生存率にほとんど影響を与えないことを報告してきた3）．また，今回用いた点眼薬におけるpHは5.5.7.5内であることから，これら傷害性は主として添加物によるものと考えられる．点眼薬には品質の劣化を防ぐ目的で保存剤が添加されており，薬剤性角膜傷害には主薬のみでなくこの保存剤が強く関与する6）．なかでも保存剤1026あたらしい眼科Vol.30，No.7，2013BACは界面活性作用により細胞膜の浸透性を高め，膜破壊，細胞質の変性を起こすことで，高い角膜上皮細胞傷害性を有する7,8）．今回用いたミケランR，ミロルRおよびLPテイカでは保存剤としてBACが用いられており，ミケランR，ミロルRに含まれるBAC濃度はそれぞれ0.005％，0.002％であった（LPテイカ中BAC濃度は非公開）．また，Guenounらは結膜細胞を用い，PG分子がBACによる細胞傷害の抑制効果を有していることを報告している9.11）．したがって，ミケランRがミロルRおよびLPテイカと比較し，毒性強度が高い要因として，添加剤中BAC濃度とLPテイカ中の主薬ラタノプロストのBAC角膜傷害性軽減効果が考えられる．一方，アイファガンRとIUテイカではBACは用いられず，保存剤としてそれぞれ亜塩素酸ナトリウム，クロルヘキシジングルコン酸塩が用いられている．これら亜塩素酸ナトリウムおよびクロルヘキシジングルコン酸塩の使用濃度は公開されておらず不明であるが，一般に点眼領域で用いられる濃度範囲〔亜塩素酸ナトリウム：0.00001.1％（w/v），クロルヘキシジングルコン酸塩：0.001.0.01％（w/w）〕を参考とし，0.001％亜塩素酸ナトリウム，0.005％クロルヘキシジングルコン酸塩をHCE-T細胞へ1分間処理した際の細胞傷害性を測定したところ，それぞれ生存率は98.4±1.5％，37.7±2.9％（平均値±標準誤差，n＝5）であった（0.5％亜塩素酸ナトリウム使用時では生存率37.2±6.9％，平均値±標準誤差，n＝5）．したがって，アイファガンRの非常に低い急性毒性は，亜塩素酸ナトリウムという安全な保存剤の適応がかかわっており，アイファガンRは慢性毒性が高いが，急性毒性は非常に低いため，実際の使用時には角膜傷害はほとんどみられず，安全な点眼薬になりうるものと考えられる．一方，IUテイカの急性・慢性毒性は，クロルヘキシジングルコン酸塩がかかわるものと示唆された．また，濃度にもよるが，BACとクロルヘキシジングルコン酸塩では，BACのほうが高い角膜傷害性を示すが，IUテイカの急性・慢性毒性は，先発品であるレスキュラRと比較し高かった3）．この毒性強度の違いには，先に示したPG分子によるBAC細胞傷害の抑制効果がかかわっているのではないかと考えられた．つぎに，緑内障治療剤・配合点眼液ザラカムR，デュオトラバRおよびコソプトRによる角膜上皮細胞への急性および慢性毒性を解析した．筆者らはすでにヒト角膜上皮細胞を用い，配合点眼液ザラカムR，デュオトラバRおよびコソプトRの傷害性の要因について明らかにしており，キサラタンRおよびチモプトールRの主薬を有する配合点眼薬ザラカムRの傷害性には，保存剤BAC濃度とチモロールマレイン酸塩が主として関与することを報告している12）．本結果から，ザラカムRの慢性毒性はザラカムR≒キサラタンR＞チモプトールRであった（表3）．ザラカムR，キサラタンRおよびチモプトールRいずれにおいても保存剤としてBACが用いられ（144）ており，その濃度はザラカムR，キサラタンRでは0.02％，チモプトールRでは0.005％であった．したがって，チモプトールRと比較し，ザラカムRおよびキサラタンRで慢性毒性が高いのは，0.02％というBAC濃度がおもに起因するものと考えられた．さらに，筆者らはチモロールマレイン酸塩とBACの細胞傷害性は相加的に上昇することもすでに明らかにしており12），ザラカムRの急性毒性が同濃度のBACを含有するキサラタンRより高い角膜上皮細胞傷害性を示す要因には，チモロールマレイン酸塩がかかわるものと示唆された（急性毒性：ザラカムR≫キサラタンR＞チモプトールR）．トラバタンズRおよびチモプトールRの主薬を有する配合点眼薬デュオトラバRの急性および慢性毒性は，ともにトラバタンズRより高かったが，チモプトールRの毒性と比較し低値であった（表3，急性および慢性毒性；チモプトールR＞デュオトラバR＞トラバタンズR）．デュオトラバRやトラバタンズRはBAC非含有製剤であり，日本アルコン株式会社が特許を有するポリクオッド（塩化ポリドロニウム）およびsofZiaTM（塩化亜鉛，ホウ酸を含むソルビトール緩衝剤保存システム）をそれぞれ保存剤として使用している．これら保存剤はBACの高い角膜上皮細胞傷害性を避けるために考案されたものであり，デュオトラバRやトラバタンズRの急性・慢性毒性がチモプトールRのそれらより低いという今回の結果はこれらの知見（製剤工夫の目的）と一致した．また，デュオトラバR中のチモロールマレイン酸塩は，デュオトラバRとトラバタンズR間における毒性の強度差にかかわるものと示唆された．コソプトR（主薬ドルゾラミド塩酸塩およびチモロールマレイン酸塩）では，急性毒性はコソプトR≒チモプトールR＞トルソプトRの順であったが，慢性毒性はチモプトールRと比較し低く，チモプトールR＞コソプトR＞トルソプトRであった（表5）．コソプトR，トルソプトRおよびチモプトールRもまた保存剤としてBACが用いられており，トルソプトR，チモプトールRおよびコソプトR中のBAC濃度は0.005％である．しかし，急性毒性はトルソプトRが最も低く，チモプトールR・トルソプトRの主薬を含むコソプトRとチモプトールRでは同程度であり，慢性毒性はチモプトールR＞コソプトR＞トルソプトRの順と，BAC濃度や主薬の関係だけでは説明できなかった．BAC濃度は角膜傷害性に強くかかわるが，筆者らはd-マンニトールが添加されている際，BACの細胞傷害性が軽減されることを明らかとしており12），コソプトRおよびトルソプトRには，添加剤としてd-マンニトールが用いられている．したがって，これらd-マンニトールの含有がコソプトRの角膜傷害性が，チモプトールR単剤より低いという結果に繋がっているものと示唆された．Invitro実験系にて点眼薬の角膜傷害性を検討するうえで，点眼薬処理時間の設定は重要である．Invivoでは一般（145）的に点眼薬は点眼後涙液により1/5まで希釈され，その後涙液として鼻涙管から排出されることが知られている13）．このように，invivoでは薬剤が長時間角膜に滞留しないことから，本実験のようなinvitro実験系では臨床（invivo）よりも短時間で強い細胞傷害性が認められる．したがって，本研究では点眼薬処理開始後2分を目安に実験を行い，点眼薬自身の角膜上皮細胞への傷害性評価を行った．急性毒性は薬剤の角膜傷害性の起こしやすさや進行速度を反映し，慢性毒性からは傷害時の大きさ（深刻度）についての情報を得ることが可能であるため，慢性毒性が高く急性毒性の低い薬剤では，正常なオキュラーサーフェスではその傷害性はわずかであるが，ドライアイ患者などでは涙液低下や滞留の増加により急性毒性が高まる可能性が考えられる．これら角膜上皮細胞傷害性は，臨床においては涙液分泌能低下などの他の作用により相乗的に角膜上皮細胞傷害をひき起こすことから12），今回のinvitroの結果（角膜傷害強度および傷害速度の算出）を基盤とした臨床結果のさらなる解析は，緑内障患者の状態に合わせた薬剤決定をより容易にするために重要である．本報告は今後の点眼薬開発および緑内障治療薬投与時における薬物選択を決定するうえで一つの指標になるものと考えられる．文献1）徳田直人，青山裕美子，井上順ほか：抗緑内障薬が角膜に及ぼす影響：臨床とinvitroでの検討．聖マリアンナ医科大学雑誌32：339-356,20042）長井紀章，伊藤吉將，岡本紀夫ほか：抗緑内障点眼薬の角膜障害におけるInVitroスクリーニング試験：SV40不死化ヒト角膜上皮細胞（HCE-T）を用いた細胞増殖抑制作用の比較．あたらしい眼科25：553-556,20083）長井紀章，大江恭平，伊藤吉將ほか：ヒト角膜上皮細胞（HCE-T）を用いた緑内障治療薬のInVitro角膜細胞傷害性評価．あたらしい眼科28：1331-1336,20114）ToropainenE,RantaVP,TalvitieAetal：Culturemodelofhumancornealepitheliumforpredictionofoculardrugabsorption.InvestOphthalmolVisSci42：2942-2948,20015）TalianaL,EvansMD,DimitrijevichSDetal：Theinfluenceofstromalcontractioninawoundmodelsystemoncornealepithelialstratification.InvestOphthalmolVisSci42：81-89,20016）NagaiN,MuraoT,OkamotoNetal：Comparisonofcornealwoundhealingratesafterinstillationofcommerciallyavailablelatanoprostandtravoprostinratdebridedcornealepithelium.JOleoSci59：135-141,20107）河嶋洋一：防腐剤の功罪（使い捨て点眼薬を含む），点眼薬の使い方．眼科診療プラクティス44，p86-87，文光堂，19998）DeSaintJeanM,BrignoleF,BringuierAFetal：EffectsofbenzalkoniumchlorideongrowthandsurvivalofChangconjunctivalcells.InvestOphthalmolVisSci40：あたらしい眼科Vol.30，No.7，20131027619-630,19999）PisellaPJ,DebbaschC,HamardPetal：Conjunctivalproinflammatoryandproapoptoticeffectsoflatanoprostandpreservedandunpreservedtimolol：anexvivoandinvitrostudy.InvestOphthalmolVisSci45：1360-1368,200410）GuenounJM,BaudouinC,RatPetal：Invitrostudyofinflammatorypotentialandtoxicityprofileoflatanoprost,travoprost,andbimatoprostinconjunctiva-derivedepithelialcells.InvestOphthalmolVisSci46：2444-2450,200511）GuenounJM,BaudouinC,RatPetal：Invitrocomparisonofcytoprotectiveandantioxidativeeffectsoflatanoprost,travoprost,andbimatoprostonconjunctiva-derivedepithelialcells.InvestOphthalmolVisSci46：4594-4599,200512）NagaiN,MuraoT,OeKetal：Aninvitroevaluationforcornealdamagesbyanti-glaucomacombinationeyedropsusinghumancornealepithelialcell（HCE-T）.YakugakuZasshi131：985-991,201113）後藤浩，吉川啓司，山田昌和ほか：眼科開業医のための疑問・難問解決策．p216-217，診断と治療社,2006＊＊＊1028あたらしい眼科Vol.30，No.7，2013（146）

《第23回日本緑内障学会原著》あたらしい眼科30（7）：1017.1021，2013c前眼部三次元光干渉断層計を用いた線維柱帯切除術後早期の濾過胞評価成田亜希子渡邊浩一郎平野雅幸小橋理栄瀬口次郎岡山済生会総合病院眼科EvaluationofEarlyGlaucomaFilteringBlebsUsing3-DimensionalAnterior-segmentOpticalCoherenceTomographyAkikoNarita,KoichiroWatanabe,MasayukiHirano,RieKobashiandJiroSeguchiDepartmentofOphthalmology,OkayamaSaiseikaiGeneralHospital目的：前眼部三次元光干渉断層計（opticalcoherencetomography：OCT）を用いて，線維柱帯切除術後眼圧良好な濾過胞の術後早期の特徴を明らかにすること．対象および方法：術後6カ月以上経過観察できた36例40眼を対象とした．術後2週目に前眼部三次元OCTを用いて濾過胞内部構造の観察を行い，結膜下マイクロシスト，濾過胞壁内の多層性低反射領域（stripingphenomenon），濾過胞下強膜の反射消失（shadingphenomenon）の有無について調べた．つぎに，術後6カ月の眼圧により，眼圧良好群と眼圧不良群の2群に分類した．結果：眼圧良好群（n＝27）では，マイクロシストを23眼に，stripingphenomenonを12眼に，shadingphenomenonを9眼に認めた．眼圧不良群（n＝13）ではマイクロシストを12眼に，stripingphenomenonを1眼に認めたが，shadingphenomenonは認めなかった．術後2週のstripingphenomenon，shadingphenomenonの有無は術後6カ月の眼圧と関連があった．結論：術後早期のstripingphenomenonならびにshadingphenomenonは，術後6カ月の良好な眼圧の予測因子となる可能性がある．Thefilteringblebsof40eyesof36patientswhohadundergonetrabeculectomywereexaminedwith3-dimensionalanterior-segmentopticalcoherencetomography,focusingoninternalfeatures：subconjunctivalmicrocysts,multiplelow-reflectivelayerswithinthefilteringblebwall（stripingphenomenon）andlossofvisualizationofthesclerabelowthefilteringbleb（shadingphenomenon）at2weeksaftersurgery.Thepatientswereclassifiedinto2categoriesaccordingtointraocularpressure（IOP）at6monthspostoperatively：goodandpoor.EarlyfilteringblebsofeyeswithgoodIOP（n＝27）hadstripingphenomenonin12eyes,shadingphenomenonin9eyesandsubconjunctivalmicrocystsin23eyes,whereasearlyfilteringblebsofeyeswithpoorIOP（n＝13）hadnoshadingphenomenon,butstripingphenomenoninoneeyeandsubconjunctivalmicrocystsin12eyes.Earlyfilteringblebswithstripingand/orshadingphenomenonwereassociatedwithgoodIOPat6monthsfollowingsurgery.〔AtarashiiGanka（JournaloftheEye）30（7）：1017.1021,2013〕Keywords：線維柱帯切除術，前眼部光干渉断層計，濾過胞．trabeculectomy,anterior-segmentopticalcoherencetomography,filteringbleb.はじめに線維柱帯切除術は，1968年にCairns1）によって紹介されて以来現在に至るまで，緑内障手術のゴールドスタンダードとされてきた．線維柱帯切除術後に長期にわたって良好な眼圧コントロールが得られるかどうかは，手術手技のみならず，緑内障の種類，年齢，人種，手術既往，術前の緑内障点眼薬の使用などが関与している2）が，最も重要なのは術後の創傷治癒過程であるとされている3）．従来から，濾過胞内の創傷治癒過程を推察し，機能良好な濾過胞の特徴を明らかにするため，組織学的検討や細隙灯顕微鏡，超音波生体顕微鏡，生体共焦点顕微鏡による観察が行われてきた2,4.12）．2005年に前眼部光干渉断層計（opticalcoherencetomog〔別刷請求先〕成田亜希子：〒700-8511岡山市北区伊福町1-17-18岡山済生会総合病院眼科Reprintrequests：AkikoNarita,M.D.,DepartmentofOphthalmology,OkayamaSaiseikaiGeneralHospital,1-17-18Ifuku-cho,Kita-ku,Okayama700-8511,JAPAN0910-1810/13/\100/頁/JCOPY（135）1017raphy：OCT）が臨床応用され，非侵襲的に前眼部の撮影が可能となった．1,310nmの長波長光を使用しているため，高い組織深達度が得られ，隅角解析，濾過胞内部の観察に用いられている3,13.16）．筆者らは，術後6カ月目に良好な眼圧を有する濾過胞の術後早期の特徴を明らかにすることを目的とし，スウェプトソース方式の前眼部三次元OCTを用いて濾過胞内部構造の観察を行った．I対象および方法2008年8月から2011年3月までに，岡山済生会総合病院で初回マイトマイシンC併用線維柱帯切除術を施行し，術後6カ月以上経過観察できた36例40眼を対象とした．緑内障病型の内訳は，原発開放隅角緑内障19眼，落屑緑内障9眼，正常眼圧緑内障4眼，続発緑内障6眼，原発閉塞隅角緑内障2眼であった．血管新生緑内障や，結膜瘢痕を生じる可能性のある眼科手術の既往眼は除外した．結膜下マイクロシストA全症例に円蓋部基底線維柱帯切除術を施行した．まず1象限にわたって輪部で結膜を切開し，円蓋部基底結膜弁を作製し，続いてリドカイン塩酸塩2％を用いてTenon.下麻酔を行った．強膜弁のサイズは縦3mm×横3mmで，1/2.2/3層の深さで作製し，その下に縦3mm×横2mm，深さ1/4層の内層強膜弁を作製した．0.4mg/mlマイトマイシンCを強膜弁下と結膜下Tenon.に3分間塗布したのち，約150mlの生理食塩水で洗浄した．つぎに，Schlemm管内壁とそれより約1mm前方までの強角膜片とともに，内層強膜弁を切除した．強膜弁は10-0ナイロン糸を用いて5糸縫合し，結膜弁も10-0ナイロン糸を用い，輪部は半返し縫合，放射状切開部は連続縫合を行った．最後にデキサメタゾン0.5mlを結膜下注射した．術後の経過観察は2週後，1カ月後，6カ月後まで1カ月毎，それ以降は2カ月毎に行った．検査項目は，細隙灯顕微鏡検査，眼圧測定，前眼部三次元OCTSS-1000CASIA（トーメーコーポレーション）を用いた濾過胞の観察を行った．BBA①①②②⑥③③④⑤⑦⑦①：濾過胞壁，②：内部水隙，③：強膜，④：強膜弁，⑤：線維柱帯切除部位，⑥：角膜，⑦：結膜下マイクロシストStripingphenomenonABBA①③③②④④①：濾過胞壁，②：内部水隙，③：強膜弁，④：stripingphenomenonShadingphenomenonABBA①③②②④④①：濾過胞壁，②：内部水隙，③：強膜弁，④：shadingphenomenon図1前眼部OCTによる濾過胞内構造1018あたらしい眼科Vol.30，No.7，2013（136）細隙灯顕微鏡検査と前眼部三次元OCT画像から，濾過胞形成不良と判断した場合，あるいは眼圧が14mmHgを超えた場合にはレーザー切糸術を施行した．ニードリングは施行しなかった．術後2週目に前眼部三次元OCT画像を用いて濾過胞内構造の評価を行い，濾過胞内所見：①結膜下マイクロシスト，②濾過胞壁内の多層性低反射領域（stripingphenomenon），③濾過胞下強膜の反射消失（shadingphenomenon）の有無について調べた（図1）．術後6カ月の眼圧により，全症例を2群に分類した．眼圧良好群：薬物療法なしでIOP≦14mmHg眼圧不良群：薬物療法の有無にかかわらずIOP＞14mmHgあるいは薬物療法ありでIOP≦14mmHg統計解析にはStatMate（Version4.1）を使用した．眼圧値の比較にはWelchのt検定を用い，濾過胞内所見の出現率の比較にはFisherの直接確率計算法を用い，有意水準は5％未満とした．II結果対象となった36例40眼の平均年齢は71.3±10.4歳，男性19例，女性17例で，術前平均眼圧は28.0±11.2mmHg，術式は超音波水晶体乳化吸引術（眼内レンズ挿入を含む）と線維柱帯切除術の同時手術が18眼，線維柱帯切除術単独が22眼，経過観察期間は20.6±11.4カ月であった（表1）．眼圧良好群は27眼，眼圧不良群は13眼で，術前の平均表1患者背景背景因子患者数36眼数40平均年齢（歳）（平均±標準偏差）71.3±10.4性別（男性/女性）19/17術式（PEA＋IOL＋LEC/LEC）18/22術前平均眼圧（mmHg）（平均±標準偏差）28.0±11.2経過観察期間（月）（平均±標準偏差）20.6±11.4PEA：超音波乳化吸引術，IOL：眼内レンズ挿入術，LEC：線維柱帯切除術．眼圧は眼圧良好群24.8±8.6mmHg，眼圧不良群24.1±7.8mmHg，術後2週の平均眼圧は眼圧良好群5.9±3.0mmHg，眼圧不良群7.5±5.7mmHgで，ともに両群間に有意差を認めなかった（p＝0.814，0.368）（表2）．術後2週の濾過胞内所見については，眼圧良好群で結膜下マイクロシストを23眼（85.2％），stripingphenomenonを12眼（44.4％），shadingphenomenonを9眼（33.3％）に認め，眼圧不良群では，結膜下マイクロシストを12眼（92.3％），stripingphenomenonを1眼（7.7％）に認め，shadingphenomenonは認めなかった．術後2週の濾過胞内のstripingphenomenon,shadingphenomenonの出現頻度は眼圧良好群で有意に高かった（p＝0.030，0.019）（表2）．III考按線維柱帯切除術後に良好な眼圧コントロールを得るためには，機能良好な濾過胞を長期にわたって維持することが必須条件である．濾過胞の形成に最も大きな影響を及ぼすのは，濾過胞内で生じる創傷治癒過程であり，それを評価するためにさまざまな試みがなされてきた．Pichtら2）は，細隙灯顕微鏡検査により，形態学的に「好ましい濾過胞発達」と「好ましくない濾過胞発達」に分類し，好ましい濾過胞発達においては，結膜マイクロシスト，びまん性濾過胞，結膜血管の減少，適度な隆起を認め，好ましくない濾過胞発達においては，結膜血管の増加，コルクスクリュー血管，被包化，丈の高いドーム状の外観を呈することを示した．さらにSacuら4）は，術後早期から1年間，細隙灯顕微鏡を用いて濾過胞形態を前向きに評価し，術後1，2週目に結膜下マイクロシストを有する眼は，術後平均眼圧が有意に低く，一方，術後1，2週目にコルクスクリュー血管を有する眼は，術後平均眼圧が有意に高かったことを示し，術後早期の形態学的特徴によって予後を予測できる可能性を示唆した．しかし，細隙灯顕微鏡による濾過胞表面の観察から濾過胞内の創傷治癒過程を推察したり，濾過胞機能を評価したりするには限界がある．さらに濾過胞深部の観察を行うことで，濾過胞発達に関するより詳細な情報が得られる可能性があ表2術後2週の濾過胞内構造と術後6カ月の眼圧との関係術後6カ月の眼圧良好群（n＝27）不良群（n＝13）p値術前眼圧（mmHg）（平均±標準偏差）24.8±8.624.1±7.80.814術後2週間の眼圧（mmHg）（平均±標準偏差）5.9±3.07.5±5.70.368術後6カ月の眼圧（mmHg）（平均±標準偏差）8.4±2.816.4±3.2＜0.001術後2週の濾過胞内構造結膜下マイクロシストStripingphenomenonShadingphenomenon23（85.2％）12（44.4％）9（33.3％）12（92.3％）1（7.7％）0（0％）0.6530.0300.019（137）あたらしい眼科Vol.30，No.7，20131019る．そこで山本ら7）は，超音波生体顕微鏡を用いて輪部基底認めたのに対し，眼圧不良群では，stripingphenomenonを線維柱帯切除術後の濾過胞内部の観察を行い，濾過胞内部の7.7％に認め，shadingphenomenonは認めなかったことか反射強度，強膜弁下のルートが視認できるかどうか，内部水ら，stripingphenomenonならびにshadingphenomenonが隙の有無，濾過胞高の4つを検討項目として濾過胞を評価術後の良好な眼圧と関連があることを示した．濾過胞の組織し，濾過胞内部の反射強度ならびに強膜弁下のルートが視認学的検討ならびに生体共焦点顕微鏡を用いた観察において，できるかどうかが眼圧コントロールと関連性が高いことを示機能良好な濾過胞は結膜下結合組織の疎な配列を有することした．また，これらのパラメータにより濾過胞をtypeLが示された8.12）．さらに生体共焦点顕微鏡による術後早期の（low-reflective），typeH（high-reflective），typeE（encap濾過胞観察で，機能不良な濾過胞は結膜下結合組織が緊密sulated），typeF（flattened）の4つに分類し，眼圧コントで，波形，網状のパターンを呈し，一方，機能良好な濾過胞ロールが良好な濾過胞のほとんどがtypeLであったことをでは，疎に配列した結膜下結合組織の柱状パターンがみら示し，超音波生体顕微鏡による濾過胞内部構造の観察によれ10），本研究において前眼部三次元OCTで認めたstripingり，濾過胞機能を評価できる可能性を示唆した．phenomenonに一致する所見であると考えた．またshadingさらに，2005年にタイムドメイン方式の前眼部OCTがphenomenonは，結膜下の結合組織内に貯留した房水のため登場し，非可視光で非侵襲的に前眼部の撮影が可能となり，に組織透過性が低下し，深部構造の後方散乱が制限されてい隅角解析，濾過胞解析に応用されるようになった．超音波生るために生じるとされており17），濾過胞内の豊富な水分量を体顕微鏡ではアイカップによる接触を要したが，前眼部反映していると考えた．OCTでは非接触にて検査が可能であるため，被検者への負結膜下マイクロシストは，光学顕微鏡と電子顕微鏡を用い担が少なく，感染症などの心配がないため，術直後でも撮影た濾過胞の観察から，線維柱帯切除術後に房水が経結膜的に可能となった．その後2008年にスウェプトソース方式の前排出されている解剖学的証拠とされており11,12），細隙灯顕微眼部OCTが使用可能となり，より高速，高解像度の解析が鏡ならびに生体共焦点顕微鏡を用いた濾過胞観察において，可能となっただけでなく，三次元解析により任意の部位の画眼圧コントロール良好な濾過胞に多く認められた2,4.6,8.10）．像を取得することが可能となった．本研究では，結膜下マイクロシストの出現率は，眼圧良好群Singhら13）は，タイムドメイン方式の前眼部OCTで線維で85.2％，眼圧不良群で92.3％とともに高く，両群間で有柱帯切除術後濾過胞を観察し，濾過胞高，濾過胞壁厚，濾過意差を認めなかった．Nakanoら16）は，タイムドメイン方式胞壁内の.胞様スペースの存在，強膜弁の強膜床への付着のの前眼部OCTを用いて術後早期濾過胞を観察し，術後2週有無，線維柱帯切除部位の開口の有無を検討した．眼圧コン目の結膜下マイクロシストの出現率は術後6カ月の眼圧と関トロール良好な濾過胞では厚い濾過胞壁を認め，一方眼圧コ連を認めなかったと報告した．したがって，結膜下マイクロントロール不良な濾過胞は，概して濾過胞高が低く，線維柱シストは，術後早期において，術後6カ月の眼圧にかかわら帯切除部位の閉塞，結膜-上強膜の強膜への付着あるいは強ず高頻度にみられる所見であると考えた．膜弁の強膜床への付着を認めたと報告し，細隙灯顕微鏡では結論として，前眼部三次元OCTSS-1000を用いて，線維観察不可能な濾過胞内部の形態学的特徴を示した．Kawana柱帯切除術後に非侵襲的に濾過胞内部の詳細な観察を行うこら14）は，スウェプトソース方式の前眼部三次元OCTを用いとができた．本研究から，術後早期濾過胞内のstripingて輪部基底線維柱帯切除術後濾過胞を観察し，眼圧コントロphenomenonやshadingphenomenonは，術後6カ月の良ール良好な濾過胞の特徴として，「広い内部水隙」，「広範な好な眼圧の予測因子となる可能性が示唆され，今後，そのよ低反射領域」，「多数のマイクロシストを有する厚い濾過胞うな所見を有する濾過胞を形成させるために，どのような術壁」を示した．また，Pfenningerら15）は，タイムドメイン中手技や術後介入が有効かを明らかにすることで，線維柱帯方式の前眼部OCTを用いて線維柱帯切除術後濾過胞の内部切除術の成功率向上に繋がると考えた．水隙の反射強度を計算し，濾過胞内部水隙の反射強度と眼圧との間に強い相関があることを示した．さらにTheelenら3）は，前眼部OCTを用いて術後早期の濾過胞を観察し，眼圧利益相反：利益相反公表基準に該当なしコントロール良好な濾過胞では，術後1週目に濾過胞壁内の多数の低反射層，濾過胞下の強膜の描出不能といった所見を文献認めることを示した．1）CairnsJE：Trabeculectomy.AmJOphthalmol66：673本研究では，前眼部三次元OCTにて術後2週目に濾過胞679,1968内構造を観察し，術後6カ月の眼圧良好群ではstriping2）PichtG,GrehnF：Classificationoffilteringblebsintrabephenomenonを44.4％に，shadingphenomenonを33.3％にculectomy：biomicroscopyandfunctionality.CurrOpin1020あたらしい眼科Vol.30，No.7，2013（138）Ophthalmol9：2-8,19983）TheelenT,WesselingP,KeunenJEEetal：Apilotstudyonslitlamp-adaptedopticalcoherencetomographyimagingoftrabeculectomyfilteringblebs.GraefesArchClinExpOphthalmol245：877-882,20074）SacuS,RainerG,FindlOetal：CorrelationbetweentheearlymorphologicalappearanceoffilteringblebsandoutcomeoftrabeculectomywithmitomycinC.JGlaucoma12：430-435,20035）CantorLB,MantravadiA,WuDunnDetal：Morphologicclassificationoffilteringblebsafterglaucomafiltrationsurgery：TheIndianablebappearancegradingscale.JGlaucoma12：266-271,20036）WellsAP,CrowstonJG,MarksJetal：Apilotstudyofasystemforgradingofdrainageblebsafterglaucomasurgery.JGlaucoma13：454-460,20047）YamamotoT,SakumaT,KitazawaY：AnultrasoundbiomicroscopicstudyoffilteringblebsaftermitomycinCtrabeculectomy.Ophthalmology102：1770-1776,19958）LabbeA,DupasB,HamardPetal：Invivoconfocalmicroscopystudyofblebsafterfilteringsurgery.Ophthalmology112：1979-1986,20059）MessmerEM,ZappDM,MackertMJetal：Invivoconfocalmicroscopyoffilteringblebsaftertrabeculectomy.ArchOphthalmol124：1095-1103,200610）GuthoffR,KlintT,SchlunckGetal：Invivoconfocalmicroscopyoffailingandfunctioningfilteringblebs.JGlaucoma15：552-558,200611）AddicksEM,QuigleyHA,GreenWRetal：Histologiccharacteristicsoffilteringblebsinglaucomatouseyes.ArchOphthalmol101：795-798,198312）PowerTP,StewartWC,StromanGA：Ultrastructualfeaturesoffiltrationblebswithdifferentclinicalappearances.OphthalmicSurgLasers27：790-794,199613）SinghM,ChewPTK,FriedmanDSetal：Imagingoftrabeculectomyblebsusinganteriorsegmentopticalcoherencetomography.Ophthalmology114：47-53,200714）KawanaK,KiuchiT,YasunoYetal：Evaluationoftrabeculectomyblebsusing3-dimensionalcorneaandanteriorsegmentopticalcoherencetomography.Ophthalmology116：848-855,200915）PfenningerL,SchneiderF,FunkJ：Internalreflectivityoffilteringblebsversusintraocularpressureinpatientswithrecenttrabeculectomy.InvestOphthalmolVisSci52：2450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《第32回日本眼薬理学会原著》あたらしい眼科30（7）：1007.1010，2013c正常ウサギの涙液量に対するジクアホソルナトリウム点眼とレバミピド点眼の効果堀裕一前野貴俊東邦大学医療センター佐倉病院眼科EffectsofDiquafosolOphthalmicSolutionsandRebamipideOphthalmicSuspensiononTearFluidVolumeinNormalRabbitsYuichiHoriandTakatoshiMaenoDepartmentofOphthalmology,TohoUniversitySakuraMedicalCenterジクアホソルナトリウム点眼およびレバミピド点眼のウサギ涙液量に対する効果について比較した．ジクアホソルナトリウム点眼およびレバミピド点眼を単回点眼し，Schirmer値および涙液メニスカス面積値を測定した．点眼10.30分後のジクアホソルナトリウム点眼群のSchirmer値および涙液メニスカス面積値は無点眼群に比べ有意に高値を示した（p＜0.01，Dunnettの多重比較検定）が，レバミピド点眼群では無点眼群と同程度であった．また，点眼5.30分後のSchirmer値および涙液メニスカス面積値は，ジクアホソルナトリウム点眼群はレバミピド点眼群に比べ有意に高値を示した（p＜0.05，Studentのt検定）．以上より，ジクアホソルナトリウム点眼はレバミピド点眼に比べ早期から正常ウサギの涙液量を増加させることが明らかとなった．両剤は，ムチン産生/分泌促進作用を有しているが，ジクアホソルナトリウム点眼は涙液分泌促進作用も有しており，薬剤の特性に基づく治療選択が重要と考えられる．Wecomparedtheeffectsofdiquafosolophthalmicsolutionswithrebamipideophthalmicsuspensionstodeterminetearfluidvolumechangesinnormalrabbits.WeperformedSchirmer’stestandmeasuredthetearmeniscustodeterminechangesintearfluidvolumebeforeandat5,10,15,30,and60minutesaftereyedropinstillation.Schirmer’stestandtearmeniscusareaincreasedsignificantlyat5,10,15,and30minutesafterinstillationofdiquafosolophthalmicsolutions,ascomparedwithbeforeeyedropinstillation（p＜0.01,Dunnett’smultiplecomparison）andwithinstillationofrebamipideophthalmicsuspensions（p＜0.05,Student-t）.TherewerenosignificantchangesinSchirmer’stestandtearmeniscusareaafterinstillationofrebamipideophthalmicsuspensions.Theseresultsindicatethatdiquafosolophthalmicsolutionsincreasedtearfluidvolumemorethandidrebamipideophthalmicsuspensionsintheearlyphase.〔AtarashiiGanka（JournaloftheEye）30（7）：1007.1010,2013〕Keywords：ジクアホソルナトリウム点眼，レバミピド点眼，涙液貯留量，正常ウサギ．diquafosolophthalmicsolutions,rebamipideophthalmicsuspensions,tearfluidvolume,normalrabbits.はじめにドライアイは，日本では，「さまざまな要因による涙液および角結膜上皮障害の慢性疾患であり，眼不快感や視機能異常を伴う」と定義され1），涙液層の安定性低下がそのコア・メカニズムと考えられている2）．涙液層は，油層と液層（水層＋ムチン層）から構成されおり，各層の機能異常がドライアイを誘発するため，それらを改善することがドライアイ治療につながる．近年，ドライアイ治療薬としてジクアホソルナトリウム点眼（ジクアスR点眼液3％，以下，ジクアス）およびレバミピド点眼（ムコスタR点眼液UD2％，以下，ムコスタ）が上市された．P2Y2受容体作動薬であるジクアスは，涙液分泌促進作用3），ムチン分泌促進作用4,5）および膜型ムチン遺伝子（MUC1，MUC4およびMUC16）発現促進作用6）を有することが報告されている．ムコスタは，杯細胞増殖作用7），ムチン様糖蛋白質産生促進作用および膜型ムチン遺伝子〔別刷請求先〕堀裕一：〒285-8741佐倉市下志津564-1東邦大学医療センター佐倉病院眼科Reprintrequests：YuichiHori,M.D.,Ph.D.,DepartmentofOphthalmology,TohoUniversitySakuraMedicalCenter,564-1Shimoshizu,Sakura,Chiba285-8741,JAPAN0910-1810/13/\100/頁/JCOPY（125）1007（MUC1およびMUC4）発現促進作用8）を有することが報告されている．両剤はムチンに対する作用を有する点では類似しているが，独自の薬理作用も兼ね備えており，薬剤の特性を理解してドライアイ治療に使用することが重要と考えられる．本研究では，ジクアスとムコスタの薬理学的特性を明らかにするために，涙液分泌に対する作用の違いを正常ウサギにてSchirmer値と涙液メニスカス面積法で比較検討した．I方法1.点眼液ジクアスR点眼液3％（参天製薬），ムコスタR点眼液UD2％（大塚製薬）を用いた．2.実験動物ウサギ（雄性白色日本）は北山ラベスより購入し，1週間馴化飼育した．本研究は，「動物の愛護及び管理に関する法律（昭和48年10月1日，法律第105号）」および「実験動物の飼養及び保管並びに苦痛の軽減に関する基準（平成18年4月28日，環境省告示第88号）」を遵守し，実施した．3.Schirmer値測定ウサギにジクアス（30眼）あるいはムコスタ（30眼）を50μl点眼した．シルメル試験紙（昭和薬品化工）挿入の約3分前に，ベノキシールR点眼液0.4％（参天製薬）を10μl点眼し，眼表面を局所麻酔した．被験点眼液点眼5，10，15，30および60分後（各6眼）に下眼瞼にシルメル試験紙を1分間挿入し，Schirmer値を測定した．4.涙液メニスカス面積測定法ウサギにジクアス（32眼）あるいはムコスタ（32眼）を50μl点眼した．点眼5，10，15および30分後（各8眼）に生理食塩水に溶解した0.1％フルオレセイン溶液3μlを下眼瞼に添加し，直後に眼表面の撮影を行った．眼表面の撮影および涙液メニスカス面積の測定は，阪元らの方法9）に従い，デジタルカメラ（FUJIXDS-560，富士フィルム）で眼の全体像を正面から撮影し，画像解析ソフト（WinROOF，三谷商事）にて涙液メニスカスの面積を算出した．無点眼群（0分，32眼）では，眼表面の撮影直前に0.1％フルオレセイン溶液3μlを添加し，同様に撮影した．5.統計解析生物実験データ統計解析システムEXSUS（シーエーシー）を用いて5％を有意水準として解析した．2群間の解析ではStudentのt検定（等分散），経時変化の解析ではDunnettの多重比較検定を行った．II結果1.Schirmer値による比較図1のとおり，ジクアス群のSchirmer値は，点眼5分後1008あたらしい眼科Vol.30，No.7，2013■：ジクアスR点眼液3％■：ムコスタR点眼液UD2％20.015.010.05.00.0無点眼図1ジクアスR点眼液3％およびムコスタR点眼液UD2％のSchirmer値に及ぼす影響各値は，6例の平均値±標準誤差を示す．＊＊：p＜0.01，無点眼群との比較（Dunnettの多重比較検定）．＃＃：p＜0.01，ムコスタR点眼液UD2％点眼群との比較（Studentのt検定）．から増加し，10.15分後に最大値に達し，その後経時的に低下して，60分後にはベースライン（無点眼群）に戻った．無点眼群に比べ，点眼10.30分後のSchirmer値は有意に高値を示した（p＜0.01，Dunnettの多重比較検定）が，ムコスタ群ではいずれの時間においても無点眼群と同程度であった．また，両群のSchirmer値を比較したところ，点眼5.30分後においてジクアス群は有意に高値を示した（p＜0.01，Studentのt検定）．2.涙液メニスカス面積値による比較図2aに点眼後の涙液メニスカス像（5.30分）を，図2bに涙液メニスカス面積値（0.30分）を示す．ジクアス群の涙液メニスカス面積値は，点眼15分後に最大値に達し，5.30分後において0分に比べ有意に高値を示した（p＜0.01，Dunnettの多重比較検定）が，ムコスタ群では，いずれの時間においても変化はなかった．両点眼群の涙液メニスカス面積値は，点眼5.30分後においてジクアス群は有意に高値を示した（点眼5.15分後：p＜0.01，点眼30分後：p＜0.05，Studentのt検定）．III考按本研究にてウサギの涙液貯留量に対するジクアスとムコスタの点眼後早期における影響をSchirmer値および涙液メニスカス面積値で比較したところ，ジクアスは，点眼10.30分後において点眼前に比べ有意に涙液貯留量が増加し，点眼5.30分後においてムコスタに比べ有意に涙液貯留量が上回っていた．今回，Schirmer値および涙液メニスカス面積測定法の2種類の方法で涙液量を評価した．Schirmer値は，局所麻酔により反射性分泌の影響を除外した値を採用した．本方法（126）Schirmer値（mm）＃＃＃＃＊＊＃＃＊＊＃＃＊＊510153060点眼後の時間（分）ジクアスR点眼液3％ムコスタR点眼液UD2％5101530点眼後の時間（分）涙液メニスカス面積値（mm2）20.015.010.05.0■：ジクアスR点眼液3％：ムコスタR点眼液UD2％＊＊＃＃＊＊＃＃＊＊＃＃＊＊＃図2ジクアスR点眼液3％およびムコスタR点眼液UD2％の涙液メニスカス面積値に及ぼす影響a：涙液メニスカス像．b：涙液メニスカス面積値．点眼後0分の値は両群共通で32例，ジクアスR点眼液3％点眼後30分の値は7例，それ以外は8例の平均値±標準誤差を示す．＊＊：p＜0.01，0分値との比較（Dunnettの多重比較検定）．＃：p＜0.05，＃＃：p＜0.01，ムコスタR点眼液UD2％群との比較（Studentのt検定）．0.00102030点眼後の時間（分）は，簡便に涙液貯留量を評価できるが，粘稠性のある点眼液などの評価には不向きであると考えられる．一方，涙液メニスカス面積測定法は，結果の解析に時間を要するが，無麻酔下で非侵襲的に測定でき，涙液の質に影響されない測定法である．本方法は，眼瞼や結膜の状態に影響を受ける欠点はあるが，涙液貯留量の評価法として確立されており9），今回，涙液メニスカス面積値による結果とSchirmer値による結果は，ほぼ同様であった．ジクアホソルナトリウムの水分分泌促進作用メカニズムは，本薬剤が結膜上皮細胞膜上のP2Y2受容体に作用すると，細胞内カルシウムイオン濃度が増加してカルシウム依存型クロライドチャネルの活性化が生じ，クロライドイオンが涙液側に放出され，それによって生じる浸透圧差により実質側から涙液側への水分分泌が誘導される10,11）．また，本薬剤はムチン分泌4,5）および膜ムチン遺伝子の発現6）を促進することから，液層（水層＋ムチン層）を全般的に改善することによりドライアイに対して治療効果を示すと考えられる．一方，レバミピドは，杯細胞増殖作用7），ムチン様糖蛋白質産生促進作用8）などが報告されているが，これらの詳細なメカニズムは不明である．本研究から本薬剤に涙液分泌促進作用は認められなかったが，元来本薬剤は，胃粘膜保護剤と（127）してわが国で長年使用されている薬剤であり，上述した作用により主に角結膜上皮の改善に効果を示すと思われる．涙液の安定性を維持することがドライアイ治療において重要であるが，近年，ジクアスとムコスタが登場したことで，ドライアイを涙液層別に治療する概念が生まれた12）．したがって，各点眼液の薬理特性を十分に理解して，ドライアイ治療を行うことが重要である．今回の結果から，ジクアスはおもに液層（水層＋ムチン層）を改善させてドライアイを治療する特長があると類推され，薬剤の特性を理解して治療を行うことが重要であると考える．利益相反：利益相反公表基準に該当なし文献1）島﨑潤（ドライアイ研究会）：2006年ドライアイ診断基準．あたらしい眼科24：181-184,20072）横井則彦，坪田一男：ドライアイのコア・メカニズム─涙液安定性仮説の考え方─．あたらしい眼科29：291-29720123）七條優子，村上忠弘，中村雅胤：正常ウサギにおけるジクあたらしい眼科Vol.30，No.7，20131009アホソルナトリウムの涙液分泌促進作用．あたらしい眼科28：1029-1033,20114）七條優子，篠宮克彦，勝田修ほか：ジクアホソルナトリウムのウサギ結膜組織からのムチン様糖蛋白質分泌促進作用．あたらしい眼科28：543-548,20115）七條優子，阪元明日香，中村雅胤：ジクアホソルナトリウムのウサギ結膜組織からのMUC5AC分泌促進作用．あたらしい眼科28：261-265,20116）七條優子，中村雅胤：培養ヒト角膜上皮細胞におけるジクアホソルナトリウムの膜結合型ムチン遺伝子の発現促進作用．あたらしい眼科28：425-429,20117）UrashimaH,TakejiY,OkamotoTetal：Rebamipideincreasesmucin-likesubstancecontentsandperiodicacidSchiffreagent-positivecellsdensityinnormalrabbits.JOculPharmacolTher28：264-270,20128）TakejiY,UrashimaH,AokiAetal：Rebamipideincreasesthemucin-likeglycoproteinproductionincornealepithelialcells.JOculPharmacolTher28：259-263,20129）阪元明日香，七條優子，山下直子ほか：正常ウサギの涙液貯留量に対するジクアホソルナトリウム点眼液と精製ヒアルロン酸ナトリウム点眼液の併用効果．あたらしい眼科29：1141-1145,201210）LiY,KuangK,YerxaBRetal：Rabbitconjunctivalepithelialtransportsfluid,andP2Y2receptoragonistsstimulateCl.andfluidsecretion.AmJPhysiol281：C595C602,200111）MurakamiT,FujiharaT,HoribeYetal：DiquafosolelicitsincreasesinnetCl.transportthroughP2Y2receptorstimulationinrabbitconjunctiva.OphthalmicRes36：89-93,200412）山口昌彦，松本幸裕，高静花ほか：TFOT（TearFilmOrientedTherapy）時代における点眼薬の使い方．FrontiersinDryEye7：112-120,2012＊＊＊1010あたらしい眼科Vol.30，No.7，2013（128）